Ready-Edit LNP平臺的核心優勢

靶向遞送

LNPs可以通過優化設計來提高CRISPR系統載荷的遞送效率

降低脫靶效應

使用mRNA作為基因編輯工具的載體，其瞬時表達特性顯著降低了脫靶效應，提高了基因編輯的精準度。

可擴展性與生產能力

基于體外轉錄（IVT）技術，mRNA可快速合成并支持大規模生產，滿足從研發到臨床前的多種應用需求。

安全性

mRNA不整合入宿主基因組，從根本上減少了插入性突變的風險，顯著提高基因編輯系統的安全性。

ReadyEdit LNP解決方案服務內容

1. 項目啟動

使用ReadyEdit LNP解決方案快速啟動您的研究項目，支持以下系統和技術：

• Cas9系統
• Cas12系統
• 堿基編輯與先導編輯

2. 編輯系統構建

構建您的CRISPR編輯系統，包括以下核心要素的合成：

• mRNA
• sgRNA
• ssDNA
• 以及更多關鍵成分

3. LNP配方優化

針對特定CRISPR應用提供經過驗證和優化的LNP配方：

• CRISPR 系統組分比例推薦
• 顯著提升項目成功率

4. 數據驗證

基于強大的篩選平臺，驗證基因編輯LNP，確保設計的有效性。

案例分享

• 基因敲除 - 使用Cas9 mRNA-LNP系統在人原代T細胞中實現TRAC基因編輯

  實驗結果：在原代T細胞TRAC基因位點，SM102配方實現了超過70%的基因編輯效率，展現了卓越的遞送能力和基因編輯效果。

  

  實驗方法：將espCas9-mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按摩爾比1:10共同包裹于LNP中。每孔轉染含2.4μg總RNA的LNP。72小時后收集細胞，提取基因組DNA（gDNA），通過Sanger測序檢測 TRAC基因位點的插入/缺失突變比例，并使用ICE工具對基因編輯效率進行分析。

• 基因敲除-使用Cas9 mRNA-LNP系統在小鼠T細胞和Jurkat細胞中實現TRAC基因編輯

  實驗結果：在小鼠T細胞系（3A9）中，使用不同的sgRNA靶點，基因編輯效率（Indel%）最高超過70%。在人源T細胞系（Jurkat）中，基因編輯效率達到80%，驗證了SM102配方的卓越遞送能力和高效基因編輯效果。

  

  

  實驗方法：將espCas9-mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按摩爾比1:10共同包裹于LNP中，每孔轉染含2.4μg總RNA的LNP，與目標細胞（3A9 和 Jurkat 細胞）共同孵育72小時。實驗后收集細胞并提取基因組DNA（gDNA），通過Sanger測序分析TRAC基因位點的插入/缺失突變（Indel），并使用ICE工具分析基因編輯效率。此外，為驗證sgRNA的靶向性能，設計了6種不同的sgRNA（sgRNA-1 至 sgRNA-6），分別靶向小鼠TRAC基因的不同間隔序列。

• 基因敲入-Cas9 mRNA-LNP系統

  實驗結果：使用ALC0315 LNP三合一遞送系統，實現了目標基因的敲入，敲入效率27%，驗證了該遞送系統在基因編輯中的有效性。

  
• 基因敲除-使用Cas12a mRNA-LNP系統在細胞中實現高效基因編輯

  實驗結果： 在HEK293T細胞中，使用Cas12a系統的編輯效率可高達80%。

  

  實驗方法： 將Cas12a mRNA和SafeEdit TRAC sgRNA按質量比5:1共同包裹于LNP（SM102-LNP和ALC0315-LNP配方）中，作為遞送系統。將LNP包裹的RNA轉染至HEK293T細胞，并檢測兩種細胞培養條件下（DMEM + 10% FBS和OptiMEM + 10% FBS）的基因編輯效率。轉染72小時后裂解細胞，提取基因組DNA，并通過NGS分析編輯效率。

• Prime Editing—先導編輯驗證

  實驗結果: 通過優化的LNP配方遞送Pemax先導編輯系統，在HEK293T細胞中實現了超過60%的基因編輯效率。同時ngRNA的加入可顯著提高編輯效率。

  

  實驗方法：將PEmax mRNA和HEK3 pegRNA（包含或不包含ngRNA）共同包裹于SM102 Mod-LNP中。將2μg RNA-LNP轉染至2×10^5個 HEK293T細胞中。轉染后48小時收集細胞，提取基因組DNA，通過NGS驗證基因編輯效率。

• 有效驗證的ReadyEdit CRISPR LNP方案

  編號	LNP配方	mRNA	sgRNA	測試細胞系及編輯效率
  1	SM102-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 97%, Jurkat 82%, T cells72% , HepG2 86%
  2	ALC0315-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 87%, Jurkat 80%, T cells 61%
  3	LP01-LNP	espCas9	TRAC	HEK293T 63%, Jurkat 75%
  4	20DODAP-LNP	espCas9	PCSK9	HepG2 87%
  5	SM102-SOPC LNP	espCas9	PCSK9	HepG2 90%
  6	SM102-LNP	HifiCas9	TRAC	HEK293T 97%, T cells 61% , HepG2 88%
  7	SM102-SOPC LNP	espCas9	TRAC	HepG2 90%
  8	SM102 LNP	Cas12a Ultra	TRAC	HEK293T 63%
  9	SM102-Mod LNP	PEmax	HEK3 pegRNA Nicking guide RNA	HEK293T 62%
  10	CXM2-LNP	CBE	TRAC	HEK293T 34%
  11	SM102-Mod LNP	CBE	TRAC	HEK293T 42%