pegRNA（Prime Editing guide RNA）合成服務

全化學合成pegRNA長達231 nt，編輯效率經驗證
無雙鏈斷裂、無需模板！支持更安全的基因編輯方案

首頁 » CRISPR產品和服務 » pegRNA（Prime Editing guide RNA）合成服務

概覽

Prime Editor（先導編輯器）具有無雙鏈斷裂、無需模板的優勢，是更安全的基因敲除、敲入、突變方案。Prime Editor由Cas9-逆轉錄酶和pegRNA兩部分構成。其中，pegRNA由引導序列（Spacer）、骨架序列（Scaffold），帶有編輯位點（Edit）的逆轉錄模板（RTT）、逆轉錄引物結合位點（PBS）組成。Cas9-逆轉錄酶會在pegRNA的引導下，精準地切開靶標DNA單鏈，根據逆轉錄模板，合成含有正確序列的DNA，完成基因編輯。

pegRNA長度一般在110nt以上，金斯瑞在化學合成長鏈RNA方面具有豐富的經驗，可以供分子量精準、純度高的產品，支持脫鹽與HPLC純化、200+種修飾及各種定制化需求。

CRISPR/Cas9基因編輯

客戶感言

Shawn Yang

Prime Medicine

I have been using GenScript to order customized critical reagents for an important assay. GenScript can always deliver materials efficiently with good quality. Their technical support is great to address any additional questions.

服務優勢

長達231 nt！支持脫鹽和HPLC級別

分子量精準，純度高
批次間一致性好

經驗證！基因編輯效率高

編輯效率可超過60%
默認修飾提升編輯效率

一站式解決方案

提供PE2/PE3 mRNA
提供經實驗驗證的操作指南

RUO至GMP級別的產品

全程支持您的項目從研發階段
走向臨床研究和IND申報

服務詳情

服務名稱	長度范圍	修飾*	純化方式	交付量	報告	生產周期（工作日）	價格
pegRNA	110-231 nt	默認修飾更穩定	脫鹽	2-100nmol 干粉（默認） TE buffer / Nuclease-free water（可選）	MS和COA報告 (HPLC純化級別提供HPLC報告，純度≥85% ^#)	7天起	歡迎詳詢
pegRNA	110-231 nt	默認修飾更穩定	HPLC純化	2-100nmol 干粉（默認） TE buffer / Nuclease-free water（可選）	MS和COA報告 (HPLC純化級別提供HPLC報告，純度≥85% ^#)	7天起	歡迎詳詢

* pegRNA任意位置添加任意數量的常規2'-甲氧基，硫代修飾不額外收費，其他可提供200種+定制化修飾，請詳詢。
# 200 nt內純度可以保證≥85%，200 nt以上請詳詢。

案例分享

218 nt pegRNA：脫鹽與HPLC純化級別，分子量精準、純度高

HPLC純化的pegRNA (218nt)：分子量精準

脫鹽純化的pegRNA (218nt)：分子量精準

HPLC純化的pegRNA (218nt)：純度高達 92.78%
添加3'tevopreQ1 motif修飾，218 nt pegRNA編輯效率提升至43.4%

實驗方法: HEK293T cells (0.2 x 10⁶個細胞) ，電轉1μg PE2/PE3 mRNA, 30pmol nicking sgRNA和90pmo不同長度的pegRNA (HPLC純化) ，靶向HEK3位點。3天后提取基因組DNA，通過Sanger測序檢測基因編輯效率。

實驗結果： 添加 3'tevopreQ1 motif的pegRNA編輯效率可高達43.4%，遠高于不加該結構的pegRNA。

備注：218nt pegRNA是181nt pegRNA添加37nt tevopreQ1 motif 組成，據報道tevopreQ1 motif 可以幫助pegRNA的3'端不被核酸外切酶降解。 (Nelson, J. W. et al., 2022).
141 nt pegRNA：編輯效率高達63.5%

HPLC純化pegRNA (141nt) : 分子量精準

HPLC純化pegRNA (141nt) : 純度高

實驗方法: HEK293T cells (0.2 x 10⁶個細胞) ，采用電轉方式，以3：1的比例加入脫鹽或HPLC純化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，同時加入0.15 μg，0.25 μg，0.375 μg，0.5 μg，0.75 μg，1.0 μg的PE2/PE3 mRNA，靶向HEK3位點，敲除5bp堿基。3天后提取基因組DNA，通過Sanger測序檢測基因編輯效率。

實驗結果： HPLC 純化pegRNA編輯效率高達63.5%，脫鹽pegRNA編輯效率高達52.5%，編輯效率呈劑量依賴增長。
脫鹽與HPLC純化級別的pegRNA細胞毒性低

實驗方法: HEK293T 細胞 (0.2 x 10⁶個細胞) ，以3：1的比例加入脫鹽或HPLC純化的pegRNA (141nt) 和nicking sgRNA，同時分別加入0.5μg、0.75μg、1.0μg的PE2/PE3 mRNA，靶向HEK3位點。3天后，檢測細胞毒性，相對細胞活性% = pegRNA加樣組細胞數量 / 空白組細胞數量。

實驗結果: 脫鹽或HPLC純化的pegRNA在45 pmol，67.5 pmol，90 pmol的濃度下對HEK293T細胞無明顯細胞毒性。