鎳填料

Ni-NTA填料

High Affinity Ni-Charged Resin FF（L00666）是一種6%高交聯瓊脂糖基質，共價偶聯螯合劑NTA，通過四個配位鍵結合Ni²⁺，高親和性純化多組氨酸標記的重組蛋白。High Affinity Ni-Charged Resin FF具有低的Ni²⁺泄漏，高的蛋白質結合能力和穩定性，并可耐受蛋白質純化中多種化學試劑。這使得Ni-NTA填料成為了純化6x His標簽融合蛋白的最佳選擇。

• 表1. Ni-NTA親和層析介質的特性

  骨架基質	6%交聯的瓊脂糖凝膠
  平均粒徑	90μm（45-165 μm）
  配體	NTA
  載量	≥50mg/ml，即50mg含His標簽的目的蛋白（34KD）/ml填料
  存儲溶液	20%乙醇（純填料體積占比50%）
  存儲溫度	2-8°C，避免凍存
  重復使用次數	可重復多次使用

• 應用案例

  1、實驗條件

  • 儀器：蠕動泵，玻璃層析柱
  • 樣品：Recombinant Protein A in E.coli extract（目的蛋白分子量：34KD）
  • 樣品體積：21L大腸桿菌裂解液（菌泥來自70L*2發酵罐）
  • 柱體積：約4.1L（D：200mm；H：13.1cm）
  • 平衡：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min，5倍柱體積
  • 上樣：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min
  • 洗雜：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 10-20 mM imidazole, pH 8.0；流速700ml/min，10倍柱體積
  • 洗脫：60 mM NaH₂PO₄, 300 mM NaCl, 250 mM imidazole, pH 8.0；流速500ml/min
  • 溶液置換：透析或超濾至1*PBS溶液中

  2、實驗結果

  

  圖1. L00666純化測試SDS-PAGE分析圖

  實驗結果說明：Ni-NTA純化載量高，結合力強，純度高

• 訂購信息

  產品編號	名稱	數量	價格	操作
  L00666	High Affinity Ni-Charged Resin FF		￥403.00 5 ml Resin (Total 10 ml) 25 ml Resin (Total 50 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)

Ni-TED填料

High Affinity Ni-TED Resin FF（L00885）是一款新型的固定化金屬螯合層析（IMAC）填料，是將TED偶聯至6%瓊脂糖凝膠介質上，通過五個配位鍵螯合Ni²⁺離子。該填料主要用于捕獲和純化分泌到真核表達培養基上清中的組氨酸標簽（His-tag）蛋白。與其它螯合劑填料相比，High Affinity Ni-TED resin具有更強的組分兼容性，可以在含有一定濃度的EDTA及DTT的情況下進行目的蛋白的高效純化。

• 表2. Ni-TED親和層析介質的特性

  骨架基質	高交聯的6%瓊脂糖凝膠
  平均粒徑	90μm（45～165μm）
  配體	TED
  動態載量	10mg/ml，即10mg含His標簽的目的蛋白（34KD）/ml填料
  耐受壓力	0.3MPa，3bar
  推薦流速	150-600cm/h
  儲存溶液	20%乙醇（純填料體積占比50%）
  儲存溫度	2～8℃，避免凍存
  重復使用次數	可重復多次使用

• 應用案例
  

  圖2. Ni-NTA和Ni-TED耐受化學試劑的對比實驗

  實驗結果說明：Ni-TED對化學試劑的耐受性略高于Ni-NTA

• 訂購信息

  產品編號	名稱	數量	價格	操作
  L00885	High Affinity Ni-TED Resin FF		￥1253.00 10 ml Resin (Total 20 ml) 50 ml Resin (Total 100 ml) 100 ml Resin (Total 200 ml)