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高親和Ni-NTA純化介質(zhì)(L00250)是把螯合劑(氮川三乙酸或NTA)共價偶聯(lián)到瓊脂糖介質(zhì)(4%交聯(lián))上,然后再螯合Ni2+制備而成。NTA能夠通過四個位點牢固的螯合Ni2+從而減少純化過程中Ni2+泄露到蛋白樣品中。本純化介質(zhì)可以純化任何表達系統(tǒng)(原核,酵母,昆蟲細胞和哺乳動物細胞等表達系統(tǒng))表達的天然或變性的His-標簽蛋白。結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白可以通過低pH緩沖液、咪唑溶液甚至組氨酸溶液洗脫下來。
結(jié)合能力可以達到20mg 6xHis標簽蛋白/ml介質(zhì)(CV)
pH3-13的范圍內(nèi)都能有好的純化效果, pH2和pH14的條件下也可以短期使用
圖1. E. coli細胞30kD可溶性重組His標簽蛋白Ni-NTA Resin純化對照 | |
Lane1:流出液(某公司) | Lane5:流出液(金斯瑞) |
Lane2:洗滌液(某公司) | Lane6:洗滌液(金斯瑞) |
Lane3:洗脫液(某公司) | Lane7:洗脫液(金斯瑞) |
Lane4:殘留物(某公司) | Lane8:殘留物(金斯瑞) |