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檢測原理

• 原理示意圖
  

  圖1. Protein A ELISA Kit, 2G (GenScript, L01043)檢測原理圖

應用實例

• 適用范圍廣
  

  圖2. L01043試劑盒檢測不同類型Protein A的標準曲線
  L01043試劑盒可用于檢測天然Protein A、普通重組Protein A和耐堿性重組Protein A等數種常見Protein A親和樹脂的配基。檢測Protein A范圍最低可至50 pg/mL。

  表1. L01043試劑盒對不同類型Protein A 的檢測范圍

  Protein A ligand standard	Typical assay working ranges
  MabSelect PrismA (Cytiva)	0.0625 – 4 ng/mL
  AT Protein A (Bestchrom)	0.0625 – 4 ng/mL
  MabSelect SuRe (Cytiva)	0.1 - 6.4 ng/mL
  UniMab 50HC Protein A (NanoMicro)	0.2 - 12.8 ng/mL
  MabPurix Protein A (Srpax)	0.05 - 3.2 ng/mL
  rSPA (Repligen)	0.1 - 6.4 ng/mL

• IgG耐受性強
  

  圖3. L01043試劑盒檢測不同濃度IgG樣本中的Protein A
  高濃度IgG會破壞Protein A與Protein A抗體之間特異性識別，導致回收率顯著降低檢測結果不準確。L01043檢測試劑盒受樣本中IgG濃度影響小，在10 mg/mL的IgG樣本中回收率可達90%以上。

  表2. L01043試劑盒在高濃度IgG 中的Protein A回收率

  Protein A (ng/mL)	Spiked to 1 mg/mL human IgG		Spiked to 10 mg/mL human IgG
  	Measured (ng/mL)	Recovery Rate	Measured (ng/mL)	Recovery Rate
  3	2.795	93%	2.816	94%
  0.5	0.463	93%	0.453	91%
  0.1875	0.184	98%	0.174	93%

• 稀釋線性好
  

  圖4. L01043試劑盒稀釋線性檢測
  L01043試劑盒檢測Protein A結果不受樣本稀釋因子的影響。

  表3. L01043試劑盒檢測Protein A濃度在線性稀釋前后具有一致性

  Sample	Mean N-fold dilution (ng/mL)	Mean 2N-fold dilution (ng/mL)	Mean 4N-fold dilution (ng/mL)	CV
  Sample A	0.49	0.41	/	12.57%
  Sample B	0.94	0.83	/	8.79%
  Sample C	91.25	96.25	97.6	3.52%
  Sample D	131.92	135.63	140.73	3.25%
  Sample E	1125.72	1190.24	1166.47	2.81%
  Sample F	1400.13	1458.67	1530.93	4.48%

• 日間精密度高
  

  圖5. L01043試劑盒日間精密度檢測
  L01043試劑盒檢測Protein A結果不受檢測時間影響。

  表4. L01043試劑盒檢測同一樣本不同時間的檢測結果具有一致性

  Sample	Mean (ng/mL)			CV
  	Day 1	Day 2	Day 3
  Sample A	0.45	0.56	0.53	11.08%
  Sample B	0.88	0.92	0.78	8.39%
  Sample C	95.03	97.26	84.12	7.63%
  Sample D	136.09	135.53	126.42	4.09%
  Sample E	1160.81	1116.52	1064.91	4.31%
  Sample F	1463.24	1486.2	1548.44	2.94%

• 批間/批內精確度高
  

  圖6. 不同批次L01043檢測不同樣本中MabSelect PrismA 的濃度
  L01043檢測試劑盒的批內精確度＜10%，批間精確度＜15%。

  表5. 不同批次的L01043試劑盒檢測同一樣本結果

  MabSelect PrismA (ng/mL)	Intra-assay		Inter-assay
  	Mean (ng/mL)	CV	Mean (ng/mL)	CV
  3	2.795	3.78%	2.794	4.21%
  0.5	0.457	4.08%	0.459	4.84%
  0.1875	0.173	5.75%	0.179	11.41%

• 回收率穩定
  

  圖7. L01043檢測不同樣本中Protien A的回收率
  L01043對不同樣本體系中Protein A的回收率穩定在80%~120%。

  表6. L01043試劑盒檢測不同樣本中Protein A的回收率數據

  Samples Purified by MabSelect PrismA	Spiked with 1 ng/mL MabSelect PrismA		Spiked with 0.25 ng/mL MabSelect PrismA
  	Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL)	Recovery Rate	Measured Spiked MabSelect PrismA (ng/mL)	Recovery Rate
  Sample A	1.02	102%	0.213	85%
  Sample B	0.887	89%	0.209	84%
  Sample C	0.971	97%	0.236	94%
  Sample D	1.151	115%	0.229	92%
  Sample E	1.047	105%	0.274	110%
  Sample F	1.044	104%	0.298	119%

常見問題解答

• 1. Protein A ELISA Kit和Protein A ELISA Kit, 2G兩款試劑盒如何選擇？

  如果您使用的protein A填料是MabSelect SuRe，我們推薦您使用Protein A ELISA Kit（產品編號：L00430）；

  如果您使用的protein A填料是MabSelect PrismA，我們推薦您使用Protein A ELISA Kit, 2G（產品編號：L01043）；

  如果客戶端使用的是其他protein A填料，我們推薦優先選擇Protein A ELISA Kit, 2G（產品編號：L01043）,因為該款試劑盒經過優化，具有更簡單的樣本處理方式和更優的回收率，且對不同結構的Protein A具有更好的適用性。

• 2. 試劑盒中提供的陽性對照標準品是什么？濃度是多少？

  Protein A ELISA Kit（產品編號：L00430）提供了兩種陽性標準品，分別是重組Protein A標準品（濃度為10 μg/ml）和MabSelect SuRe Protein A標準品（濃度同樣為10 μg/ml）；

  Protein A ELISA Kit, 2G（產品編號：L01043）提供了MabSelect PrismA標準品（濃度為1 μg/ml）；

  這些標準品用于在實驗過程中建立標準曲線，以確保結果的準確性和可重復性。

• 3. 如果客戶端使用的protein A與試劑盒中提供的Protein A標準品不同，那么該如何選擇標準品？金斯瑞是否提供？

  金斯瑞Protein A ELISA Kit（產品編號：L00430）和Protein A ELISA Kit, 2G（產品編號：L01043）可以識別不同結構的天然Protein A、重組Protein A、耐堿性Protein A。為了更準確的定量樣本中殘留的Protein A，建議使用與純化介質中相同的protein A配基作為標準品，并參考試劑盒中描述的方法和法規的要求進行驗證。金斯瑞不提供這些額外的標準品，建議從純化介質供應商購買。

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