實(shí)驗(yàn)方法:將Fluc mRNA(N1-methyl-pseU)分別封裝在SM102-LNP及修飾了抗人CD3抗體 (克隆號: OKT3, 鼠源單克隆抗體, 金斯瑞, A02199)的SM102-LNP中。使用100 ng封裝的mRNA 與Jurkat細(xì)胞在含10% FBS的RPMI 1640培養(yǎng)基中37℃孵育24、48小時(shí)后,使用熒光素酶檢測試劑盒(Promega,E4030)檢測mRNA的表達(dá)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:抗CD3抗體修飾的SM102-LNP顯著提高了Fluc mRNA在Jurkat細(xì)胞中的遞送效率,在24小時(shí)和48小時(shí)均表現(xiàn)出更高的熒光素酶表達(dá)水平。
實(shí)驗(yàn)方法:將eGFP mRNA(N1-methyl-pseU)分別封裝在SM102-LNP中及修飾了抗人CD3抗體的SM102-LNP中。使用不同劑量(10-150 ng)封裝的mRNA與原代T細(xì)胞孵育24小時(shí)。使用流式細(xì)胞儀檢測eGFP的表達(dá)。W1、W2和W3表示不同的洗滌條件。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:抗CD3抗體修飾的SM102-LNP提高了eGFP mRNA在原代T細(xì)胞中的遞送效率,在低劑量下效果更為顯著。