RNP(Cas9和sgRNA)復合物VS傳統(tǒng)質粒/慢病毒的優(yōu)勢
- 無DNA干擾:避免非預期的基因片段插入
- 無免疫反應干擾:杜絕影響宿主細胞的因素
- 轉染效率高:適合質粒轉染效率低的宿主細胞
- 簡便快捷:不需轉錄表達與降解質粒,縮短實驗周期
- 提高編輯效率:Cas9蛋白與sgRNA結合效率高、更穩(wěn)定
- 降低脫靶效應:Cas9蛋白與sgRNA非持續(xù)表達,可降解
sgRNA VS crRNA:tracrRNA 的優(yōu)勢
- 操作便捷:無需退火操作使crRNA和tracrRNA結合
- 更穩(wěn)定:與Cas9蛋白結合更牢固
- 編輯效率更高:提高實驗效率與成功率,原代細胞、干細胞優(yōu)選
crRNA:tracrRNA(2條)和sgRNA(1條)用于CRISPR基因編輯
crRNA:tracrRNA:1條crRNA序列與靶序列結合,1條tracrRNA與Cas9蛋白結合。
sgRNA:1條序列,約20nt序列與靶序列結合,約80nt序列與Cas9蛋白結合。