Quality Assurance
金斯瑞的每一條多肽合成均需經過嚴格的質控過程。特有的全面質控管理平臺Total Quality Management (TQM)經由ISO 9001:2015認證,要求每條多肽在合成、純化和QC過程中共進行三次反向高效液相色譜(RP-HPLC)和質譜分析(MS)以確保每條多肽的質量。在TQM最后一步,金斯瑞會要求進行額外QA復檢進一步保證高質量的多肽交付。
TQM Platform for Peptide Services
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金斯瑞不僅為每條多肽提供RP-HPLC和MS檢測,還提供額外的AccuPep+QC增值服務。 |
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獨特的ArgonShield™包裝技術,確保每條多肽高質量交付。 |
金斯瑞為每條多肽提供HPLC和MS 檢測報告,以下指南會為您介紹如何分析報告,根據報告如何判定多肽質量。
即使經過多輪純化,多肽中也會存在少量的雜質。因此,金斯瑞為每條多肽提供反相高效液相色譜(Reversed-phase High Performance Liquid Chromatography, RP-HPLC)。
什么是RP-HPLC?
RP-HPLC是一種常用的分析方式,可以有效地分離混合物中各組分。通常將待分析樣品溶于水中,有時在分析前也會添加有機溶劑或者酸助溶。樣品隨著流動相進入分析柱,溶于流動相的各組分經過固定相時,吸附在固定相表面。隨著流動相濃度的逐漸增加,樣品被洗脫下來。不同性質的樣品組分,在柱子上的停留時間是不一樣的,也成為保留時間。由于肽鍵的最大吸收波長是220nm,通常當樣品從柱子上洗脫后,會用UV檢測器來檢測,并將檢測信號轉化為曲線圖,稱作色譜圖,由UV吸光度和樣品洗脫時間組成。
洗脫多肽的高分辨率主要取決于吸附柱和有機溶劑的選擇,尤其是洗脫梯度。生產過程中使用的吸附柱的理論板高度會定期檢查,根據不同的多肽,所使用的洗脫梯度也會有差異。兩者都旨在維持多肽的高分辨率。
金斯瑞尤其注重HPLC方法的開發來保證您的定制多肽的有效分離和高精確度。
HPLC 報告解析
金斯瑞使用電噴霧離子質譜分析法(Electrospray Ionization Mass Spectrometry, ESI-MS)來確定目標多肽的分子質量。
什么是ESI-MS?
ESI-MS是一種用于研究大分子的分析工具,它可以分別測定所有電離分析物的質荷比(m/z)。
電噴霧電離技術是一種應用廣泛的軟電離技術,它從分析物的溶液中產生一個完整的帶電離子,而不產生大分子的碎片,為測量大分子的分子量提供了一種可靠、準確的方法。一般來說,肽段可以電離成帶多個電荷的狀態,或帶正電荷,或帶負電荷,這取決于序列中堿性殘基和酸性殘基的數量。
離子化后的多肽被轉移到質譜檢測器中,例如:四級桿、飛行時間。它可以根據它們的m/z分離所有的帶電離子。所有這些單獨的離子分別由離子檢測器(如電子倍增器)檢測,最后轉換成一個名為質譜的可視圖形,即所有被檢測離子的離子豐度與m/z值的關系圖。質譜顯示所有檢測到的m/z信號和離子的相對強度,相對于最高的m/z峰,這個峰被定義為100%。
對于大多數多肽來說,質譜顯示一個以上的m/z峰代表一系列電荷態。理論上,這些峰的m/z值應該得到相同的計算分子量,但由于儀器分辨率的限制,這些峰的計算結果實際上略有不同。在我們的MS報告中,從分析物最豐富的m/z峰計算出的分子量在很大程度上被用來消除儀器的變化。
定期對質譜儀進行清洗和校準,確保質譜儀的質量精度和準確度。
MS 報告解析