網(wǎng)絡(luò)研討會(huì) ? 3步剖析腺苷酸化抗體開發(fā)實(shí)例 - 金斯瑞
翻譯后修飾(PTM)大大拓寬了特定蛋白質(zhì)組的功能范圍,對于蛋白的識(shí)別和調(diào)控的理解具有重要的研究意義。然而,識(shí)別的高親和力,識(shí)別修飾之間小而重要的差異以及相關(guān)的交叉反應(yīng)的危險(xiǎn)一直是抗體開發(fā)的挑戰(zhàn)。
腺苷酸化也是一種PTM,腺苷酸化在細(xì)菌感染和蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮作用,本次網(wǎng)絡(luò)研討會(huì)重點(diǎn)關(guān)注小鼠腺苷酸化單克隆抗體的開發(fā),包括腺苷酸化多肽的設(shè)計(jì),特異性結(jié)合和主鏈不依賴型選擇過程,以及前導(dǎo)抗體的表征及其潛力等。
腺苷酸化是指通過一磷酸腺苷 (AMP) 對蛋白質(zhì)進(jìn)行翻譯后修飾。 腺苷酸化發(fā)生在蛋白質(zhì)側(cè)鏈絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸殘基的羥基上。 在人類中,腺苷酸轉(zhuǎn)移酶 FICD 參與催化 AMP 從 ATP 轉(zhuǎn)移到靶蛋白。
目前沒有用于檢測甲基化蛋白的特異性和可靠的抗體,Dorothea 的項(xiàng)目專注于開發(fā)一種可以特異性檢測翻譯后修飾的單克隆抗體。 理想情況下,抗體能夠識(shí)別小的腺苷酸修飾,區(qū)分腺苷酸化和其他密切相關(guān)的修飾。 為了實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo),Dorothea使用了一種短而簡單的具有非免疫骨架的腺苷酸化多肽用于動(dòng)物免疫。
用于特異性和靈敏檢測腺苷酸蛋白的抗體開發(fā)依賴于金斯瑞的定制單克隆抗體生成服務(wù)。在該項(xiàng)目中,用合成腺苷酸化多肽免疫10只小鼠,從脾臟中分離產(chǎn)生抗體的 B 細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,用于開發(fā)雜交瘤細(xì)胞。
Dorothea H?pfner在慕尼黑大學(xué)學(xué)習(xí)分子生物技術(shù)和生物化學(xué),在美國舊金山的拜耳醫(yī)藥保健有限責(zé)任公司的Biologics Research實(shí)習(xí)。 她目前是慕尼黑工業(yè)大學(xué)的博士研究生,在德國UKE生物化學(xué)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系的Aymelt Itzen實(shí)驗(yàn)室專注于細(xì)菌感染環(huán)境中的腺苷酸化。她的工作得到Konrad Adenauer基金會(huì)的支持。