選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)

蛋白表達(dá)被普遍應(yīng)用于不同的科學(xué)研究中。目前有四種主要的表達(dá)系統(tǒng)可供研究人員選擇，以找到適合其特定應(yīng)用的表達(dá)系統(tǒng)。分別是原核表達(dá)系統(tǒng)、桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)。

目的蛋白的性質(zhì)影響如何選擇表達(dá)該蛋白的表達(dá)系統(tǒng)，根據(jù)這一標(biāo)準(zhǔn)來選擇合適的蛋白表達(dá)系統(tǒng)很重要。這些性質(zhì)包括序列和結(jié)構(gòu)以及活性、功能、折疊以及翻譯后修飾。翻譯后修飾（包括連接蛋白化學(xué)或物理性質(zhì)的功能基團(tuán)，包括醋酸鹽、磷酸化、各種脂類或糖基化等）對于蛋白的下游應(yīng)用可能是必要的。盡管每個表達(dá)系統(tǒng)具有影響這些標(biāo)準(zhǔn)的不同能力，但重要的是要考慮到某些蛋白適合在一個系統(tǒng)中表達(dá)卻對另一個系統(tǒng)具有毒性。金斯瑞的蛋白質(zhì)表達(dá)評估服務(wù)可以通過在細(xì)菌、昆蟲或哺乳動物表達(dá)系統(tǒng)中進(jìn)行表達(dá)測試以獲得合適的表達(dá)系統(tǒng)。

E.coli是常用的蛋白表達(dá)系統(tǒng)并且蛋白表達(dá)通常是由一個DNA質(zhì)粒表達(dá)載體誘導(dǎo)的。原核蛋白表達(dá)系統(tǒng)以大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)為代表，具有遺傳背景清晰、成本低、表達(dá)量高的特點(diǎn)。如果目的蛋白的來源是原核生物，E.coli 是多數(shù)研究人員的選擇。若蛋白來源于真核生物，該系統(tǒng)無翻譯后修飾能力，選擇其他表達(dá)系統(tǒng)會更優(yōu)。但翻譯后修飾對于目的蛋白不重要的情況下，E.coli 仍然是真核生物蛋白表達(dá)的良好選擇。

桿狀病毒-昆蟲表達(dá)系統(tǒng)可表達(dá)不能用大腸桿菌表達(dá)的高質(zhì)量的糖基化蛋白。昆蟲細(xì)胞是一個相比原核系統(tǒng)更高級的真核系統(tǒng)，因此能夠進(jìn)行更復(fù)雜的翻譯后修飾。

哺乳動物細(xì)胞與細(xì)菌相比，具有更復(fù)雜的蛋白生產(chǎn)能力，包括協(xié)助蛋白折疊成正確構(gòu)象的機(jī)制，比如伴侶蛋白和修飾（糖基化、甲基化、磷酸化等）。

對于哺乳動物來源的蛋白，其活性不僅與一級結(jié)構(gòu)（序列）有關(guān)，而且與構(gòu)象和修飾有關(guān)，而其他表達(dá)系統(tǒng)，尤其是親緣關(guān)系遠(yuǎn)的系統(tǒng)，無法實現(xiàn)哺乳動物細(xì)胞中天然存在的所有修飾。金斯瑞使用經(jīng)過基因修飾的CHO和HEK293細(xì)胞，結(jié)合特定的表達(dá)載體，生產(chǎn)出高表達(dá)量、高質(zhì)量的蛋白，已被數(shù)百個成功的項目所證明。

蛋白表達(dá)和性質(zhì)分析的一站式服務(wù)

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