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通用問題

重組蛋白質相關

  • 1. 貴公司提供哪些類型的重組蛋白?以何種格式提供?

    GenScript提供的大多數重組蛋白是細胞因子、生長因子和趨化因子。我們還在不斷擴大重組蛋白的范圍,包括神經營養素、病毒抗原和酶。GenScript提供的重組蛋白均為無菌、凍干、無載體的分裝形式,并配有相應的緩沖液。我們的重組蛋白不添加任何額外的蛋白質或防腐劑。

  • 2. 如何生產重組蛋白?真核表達(酵母、昆蟲和哺乳動物細胞)與大腸桿菌表達相比有什么優勢?

    我們的大多數重組蛋白都是在真核系統中生產的,分析證書中會為您提供有關單個產品如何生產的具體信息。真核生物作為表達系統有幾個優勢。

    • 真核生物本身很少分泌原生蛋白,但卻能分泌重組蛋白。因此,真核生物系統通常是分泌表達重組蛋白然后進行純化。在大腸桿菌中制造的重組蛋白通常被定位在包涵體中。從包涵體中純化重組蛋白需要在苛刻的條件下進行,然后再進行重折疊處理。這些苛刻的處理會對蛋白質的功能產生負面影響。
    • 真核生物分泌的重組蛋白由高爾基體處理,因此可以進行翻譯后修飾。這些修飾包括糖基化、磷酸化和硫酸化。有許多蛋白質需要經過修飾才能發揮功能、正常折疊或溶解。
    • 真核生物沒有像大腸桿菌那樣的細菌細胞壁,因此不存在可影響目標系統炎癥反應的內毒素(脂多糖)。
  • 3. 當我打開小瓶時,什么也沒看到。我怎么知道小瓶里有蛋白質?

    打開小瓶之前要先離心!我們的大多數產品都是用低濃度緩沖液凍干的,因此幾微克的產品可能不太明顯。我們建議在打開前將小瓶放入微型離心機中離心 20-30秒,以將可能滯留在瓶蓋或試管側面的蛋白質離心到小瓶底部。我們的質量控制程序可確保每小瓶中的產品量正確無誤。

  • 4. 如何復溶凍干粉?重組蛋白復溶可接受的體積是多少?重組蛋白復溶后的濃度是多少?

    請查閱您的貨物中包含的COA,以了解復溶方法,因為并非所有產品都在相同的條件下進行復溶。一般來說,我們建議使用無菌水進行復溶。將推薦體積的無菌水加入小瓶中,輕輕搖動以完全溶解蛋白質。不要渦旋。

    重組蛋白的濃度取決于復溶體積。例如,如果在100μL載體蛋白溶液中復溶10μg重組蛋白,則濃度為10μg/100μL或100μg/mL。

  • 5. 如何儲存重組蛋白?重組蛋白的保質期多長?

    若要長期保存,蛋白溶液應與載體蛋白(如0.1% BSA或0.1% HSA)一起以等分的形式保存,并在-20°C下冷凍保存。請注意,每次冷凍/解凍循環都可能導致蛋白質發生變性。除非COA上另有說明,大多數重組蛋白的保質期為一年。請按照COA上的規定在最佳儲存條件下保存。

  • 6. 什么是載體蛋白?

    載體蛋白(如HSA或BSA)用于提高重組蛋白的穩定性,避免產品粘附在瓶壁上。

  • 7. 如何確定重組蛋白的量?為什么我的檢測結果與你們的結果不同?

    我們通過BCA、SDS-PAGE、HPLC和其他方法確定重組蛋白的量。不同的檢測方法會產生不同的定量結果。如果您采用不同的檢測方法,有時差異會很大。蛋白質在儲存過程中也有可能形成聚集體,從而在復溶和離心后造成損失。

  • 8. 為什么有些蛋白質融合了標簽?蛋白質標簽會影響蛋白質活性嗎?

    金斯瑞大多數重組蛋白產品都是無標簽的, 不過蛋白的標簽可用于多種不同的應用。

    • 蛋白標簽可用于蛋白質純化。
    • 當沒有特定抗體時,標簽用于蛋白質印跡或 ELISA 中的蛋白質檢測。
    • Fc標簽可穩定分子,可能會延長連接產物的半衰期。 由于Fc片段傾向于二聚化,因此它有助于將連接的蛋白(特別是受體)形成具有生物活性的二聚體。

蛋白質標簽可能會也可能不會影響蛋白質的活性。在某些應用中,小標簽(如 His-tag)可能不會影響蛋白質的活性,因此無需去除。例如,蛋白質數據庫中有100多種His標簽蛋白的結構。這表明,小的His標記通常不會干擾蛋白質的正確折疊。此外,我們的蛋白質網頁上還列出了測試的活性結果。如果您擔心標簽會干擾蛋白質活性,而網上又沒有活性數據,請隨時通過product@genscript.com.cn與我們聯系,獲取最新信息。

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