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內毒素是什么?

內毒素是一種復雜的脂多糖(LPS),存在于大多數致病性革蘭氏陰性菌的外膜上。即使煮沸30分鐘也不會破壞內毒素的穩定性,但它可以被某些強氧化劑(如超氧化物、過氧化物和次氯酸鹽)所降解。

如何選擇內毒素檢測方法?

選擇合適的內毒素檢測方法前需要考慮三件事:待測樣本類型、待測樣本對檢測的干擾因素以及需要檢測的內毒素限值。凝膠法是最簡單、應用最廣泛的內毒素檢測方法,其靈敏度高達0.03EU/mL。顯色法則將其靈敏度定義為標準曲線中最低的內毒素濃度,檢測結果需要分光光度計來讀取。

內毒素的最大允許水平是多少?

一個EU的內毒素大約相當于100 pg的大腸桿菌脂多糖(約105個細菌所產的量)。當人類處于5EU/kg體重的內毒素中就可能會出現癥狀,這些癥狀包括但不限于發燒、低血壓、心率加快和尿量降低。因此,即使是血液中小劑量的內毒素往往也是致命的。

FDA為在美國銷售的藥物設定了以下最大允許內毒素水平:

藥物(鞘內注射)-0.2EU/kg體重

藥物(非鞘內注射)-5EU/kg體重

無菌水-0.25-0.5EU/ml(取決于預期用途)

內毒素與內毒素去除樹脂的結合會受到其他因素的干擾嗎?

會的。其他去垢劑和高水平的離液劑(尿素和胍)會降低多粘菌素B對LPS的親和力。BSA等蛋白質也可以通過與內毒素緊密結合降低內毒素與內毒素去除樹脂的相互作用和結合能力。這種結合能力的降低有時可以通過增加固定化多粘菌素B的操作來緩解。然而,一些蛋白質可以在不抑制內毒素與樹脂結合的情況下與內毒素緊密結合。這樣,蛋白質將與內毒素一同與內毒素去除樹脂結合,可能會導致目標蛋白質的損失。

操作視頻

ToxinSensor? Chromogenic LAL Endotoxin Assay Kit (GenScript, L00350) 操作視頻

ToxinSensor? Gel Clot Endotoxin Assay Kit (GenScript, L00351) 操作視頻

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