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開始蛋白結晶前的4個質量評價參數

實現成功結晶的最重要因素之一是蛋白質的質量。優化蛋白質的純度和均一性，同時保持其組成和結構，可增加成功結晶的機會。

在結晶之前，應評價以下質量參數：

純度

  • 蛋白質純度 是成功結晶的關鍵
  • 根據SDS-PAGE和考馬斯藍染色法. 評估，我們通常建議蛋白質純度至少為95%。一般的金屬離子純化方法可使蛋白質純度超過95%。
  • 整個樣品的翻譯后修飾應是均一的。

均一性

  • 整個樣品中的蛋白質應具有相同的形態和大小。
  • 使用凝膠過濾法以確保純化后的樣品具有均一性。
  • 如有可能，使用動態光散射法評估樣品，以確認蛋白質群體的均一性。

組成

  • 在整個純化過程中蛋白質會發生降解。
  • 因此，建議在純化后立即進行結晶。

結構

  • 最好在結晶前進行圓二色（CD）光譜分析，以確認蛋白質的二級結構。
  • 如有可能，通過適當的定量分析法檢查蛋白質的生物活性。

蛋白質純化樹脂

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