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蛋白復性服務

大腸桿菌中蛋白的高表達通常伴隨著目的蛋白在包涵體中聚集。雖然尚未完全了解包涵體形成的確切機制,并且可能因不同的蛋白和表達條件而有所不同,但通常認為靶蛋白的制備速度過快,以至于大腸桿菌的細胞翻譯機制無法協助蛋白以其天然3D構象折疊,從而導致錯誤折疊并最終形成包涵體。這些不可溶的聚集是非功能性的并阻礙研究的進程。通過體外重新折疊復性來恢復目的蛋白的生物學活性是一項艱巨的挑戰。金斯瑞蛋白折疊復性服務提供一系列解決方案。

我們專有的復性技術,包括高靜水壓技術、小分子添加劑和柱復性方法。

服務詳情

  1. 分析目的蛋白的理化性質
  2. 1L體系中進行復性優化
  3. 復性策略是根據蛋白的序列及結構性質決定的。一般來說,我們的方案包括以下幾點:
    1. 直接稀釋法
    2. 透析以及滲濾
    3. 小分子物質輔助:
      • 變性劑
      • 氨基酸
      • 聚合物:膠束和脂質體
      • 酒精
      • 還原/氧化試劑
      • 鹽:Na/K/Mg-Cl and (NH4)2SO4
      • 糖類:葡萄糖、蔗糖和海藻糖
    4. 人工伴侶:去污劑和非去污劑
    5. 色譜復性技術:SEC(分子排阻層析法)、HIC(疏水相互作用層析法)、親和層析和IEC(離子交換層析法)
    6. 分子伴侶介導法:ATP-依賴型和ATP-非依賴型
    7. 梯度法:PH、溫度、靜水壓和變性劑

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案例分享

客戶感言

Testimonials -Dr. Barry Bradford

Kansas State University, USA

"GenScript provides fast, professional protein synthesis services at very reasonable prices. By making it cost-effective to outsource protein production, GenScript has made it possible for my lab to focus on our own area of expertise and get more research done. The detailed planning, updates, and reports that GenScript provides all of the quality control that one could ask for. I strongly recommend GenScript's protein production service."

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