| No. | Control Titer (mg/L) | Fuco-free Titer (mg/L) | Titer Differences (%) |
|---|---|---|---|
| test-1 | 574 | 577 | 0.50% |
| test-2 | 575 | 612 | 6.07% |
| test-3 | 577 | 565 | -2.08% |
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抗體巖藻糖修飾與ADCC效應(yīng)
抗體介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用（Antibody-dependent cellular cytotoxicity, ADCC）是指抗體的Fc與自然殺傷細(xì)胞（Natural Killer Cell, NK）表面的Fc?家族的FcγRIIIa（CD16a）結(jié)合后激活NK細(xì)胞內(nèi)一系列反應(yīng)，最終導(dǎo)致NK細(xì)胞殺傷表達(dá)特異性抗原的靶細(xì)胞。然而，研究表明，抗體上Asn297位點(diǎn)的巖藻糖 (fucose) 會(huì)阻礙IgG與Fc?受體的結(jié)合，從而顯著降低ADCC效果。相反地，去除抗體Asn297位點(diǎn)的巖藻糖可以增強(qiáng)抗體與FcγRIIIa的親和力，使NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC效果提高數(shù)倍。換句話說，減少甚至去除巖藻糖化修飾有利于提高依賴ADCC活性的抗體藥物的療效。
金斯瑞FucoFree TurboCHO? 抗體表達(dá)平臺(tái)
現(xiàn)階段，比較有效的降低巖藻糖基化水平的方法是在CHO細(xì)胞培養(yǎng)基中添加抗體巖藻糖基化通路上相關(guān)酶的抑制劑或者巖藻糖類似物 (如2FF)，但是，對(duì)于不同類型的抗體分子，這些添加劑的濃度以及添加時(shí)機(jī)也不盡相同，且在工藝放大階段抗體的穩(wěn)定性也有待考察。另外，這些添加劑的成本較高，致使該方法得到的低巖藻糖基化的抗體性價(jià)比不高。
為了避免添加劑法造成的這些弊端，金斯瑞采用了基因編輯技術(shù)敲除了CHO-K1細(xì)胞基因組內(nèi)的兩個(gè)巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶 (Fut8) 等位基因, Fut8是一個(gè)能催化形成α-1,6巖藻糖苷鍵的巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶，將該基因敲除，細(xì)胞則無法正常進(jìn)行對(duì)分泌抗體進(jìn)行巖藻糖修飾，從而達(dá)到去除巖藻糖基化的目的。利用該基因工程方法，金斯瑞成功構(gòu)建去巖藻糖CHO-K1細(xì)胞系FucoFree TurboCHO?，從源頭上去除巖藻糖基化且對(duì)不同抗體類型具有普適性。
高性價(jià)比
經(jīng)濟(jì)高效實(shí)現(xiàn)大規(guī)模表達(dá)
快速交付
快至14個(gè)自然日交付克級(jí)抗體
超高質(zhì)量
嚴(yán)格的質(zhì)量把控
| 描述 | |
|---|---|
| 蛋白需求量 |
|
| 交付周期 | 快至14個(gè)自然日 |
| 表達(dá)類型 |
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| 質(zhì)檢內(nèi)容 |
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| 目標(biāo)交付標(biāo)準(zhǔn) |
|
| 額外服務(wù) | ELISA, Cell based assay, FACS screening, Octet? BLI assay, Biacore? SPR assay, etc. |
| No. | Control Titer (mg/L) | Fuco-free Titer (mg/L) | Titer Differences (%) |
|---|---|---|---|
| test-1 | 574 | 577 | 0.50% |
| test-2 | 575 | 612 | 6.07% |
| test-3 | 577 | 565 | -2.08% |
| N-Glycan | G0F-GlcNAc | Man 5 | G0F | G1F |
|---|---|---|---|---|
| TurboCHO? | 15.5% | 10.7% | 65.3% | 8.5% |
| N-Glycan | G0F-GlcNAc | Man 5 | G0 | G1 |
| FucoFree TurboCHO? | 15.0% | 8.9% | 71.2% | 4.9% |
三大重組蛋白表達(dá)平臺(tái)、完善的穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建平臺(tái)以及技術(shù)資源介紹。
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