| Product Description |
螢火蟲熒光素酶(firefly luciferase)是一種分子量約為61kD的蛋白，在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，并發(fā)出波長(zhǎng)為560 nm左右的化學(xué)發(fā)光(luminescence)。化學(xué)發(fā)光可以通過(guò)化學(xué)發(fā)光儀(luminometer)或液閃測(cè)定儀進(jìn)行定量測(cè)定。其反應(yīng)原理如下：
通過(guò)把特定靶點(diǎn)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件或5’啟動(dòng)子區(qū)克隆在luciferase的上游，或把3’-UTR區(qū)克隆在luciferase的下游等，構(gòu)建成報(bào)告基因(reporter gene)質(zhì)粒，然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞。將熒光素酶轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞中，可構(gòu)造出特定靶點(diǎn)的報(bào)告系統(tǒng)，研究靶點(diǎn)的調(diào)控狀態(tài)。該方法是信號(hào)通路、活性測(cè)試、體內(nèi)示蹤等研究的工具，廣受科研、醫(yī)藥、檢測(cè)等領(lǐng)域歡迎，是一種強(qiáng)大的生物學(xué)檢測(cè)手段。
螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒，可用于測(cè)試上述反應(yīng)生成的化學(xué)發(fā)光（luminescence）信號(hào)。其強(qiáng)大的性能適用于高通量和超高通量的螢光素酶活性檢測(cè)，對(duì)混合和分裝條件不敏感，可重復(fù)性更高，是高密度微孔板的理想選擇，且更易儲(chǔ)存。
本試劑盒不提供螢光素酶，僅提供與其反應(yīng)的其它組分。兩者一經(jīng)混合，即產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光信號(hào)，對(duì)該發(fā)光信號(hào)進(jìn)行分析檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果即表明受特定靶點(diǎn)調(diào)控的報(bào)告基因在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)量，該結(jié)果用于指示與特定靶點(diǎn)相互作用的分子生物活性（Bioactivity）。在藥理學(xué)（Pharmacology）分析中，因其能直接展示藥物作用機(jī)理（MOA, mechanism of action），常用于生物藥的相對(duì)效價(jià)（RP, relative potency）測(cè)定。鑒于此類檢測(cè)的穩(wěn)定性、高信號(hào)值、誤差小等特點(diǎn)，可廣泛應(yīng)用于藥理機(jī)制研究、藥物發(fā)現(xiàn)、質(zhì)檢、批間放行等各個(gè)環(huán)節(jié)。 |
| Key Features |
檢測(cè)方便：即加即測(cè)，一步檢測(cè)，無(wú)需洗滌或收集細(xì)胞等繁瑣過(guò)程。
超高靈敏度：分辨率可低至50個(gè)細(xì)胞（具體根據(jù)報(bào)告基因表達(dá)量差異）。
高穩(wěn)定性：信號(hào)半衰期長(zhǎng)至1小時(shí)，有效降低檢測(cè)結(jié)果的批間誤差。
有效期長(zhǎng)：配置后的反應(yīng)液，室溫下避光條件可保存1天，4℃下避光可保存3天。
耐受性好：可耐受各種常見培養(yǎng)液及試劑，對(duì)檢測(cè)信號(hào)無(wú)影響。如：酚紅、10%以內(nèi)的胎牛血清或小牛血清、2%以內(nèi)的DMSO或乙醇、常用的鹽類或金屬離子等等。
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| Kit Contents |
| 組分 |
L00877C-100 (100T) |
L00877C-1000 (1000T) |
| 底物 (干粉) |
1 瓶 |
1 瓶 |
| 裂解液 |
10 ml |
100 ml |
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| Storage |
檢測(cè)組分未混合前，可在-20℃下避光保存一年。混合后，可分裝后在-80℃保存一年。 |
可廣泛應(yīng)用于藥理機(jī)制研究、藥物發(fā)現(xiàn)、質(zhì)檢、批間放行等各個(gè)環(huán)節(jié)。
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圖2. 本試劑盒用于轉(zhuǎn)染螢火蟲熒光素酶報(bào)告基因的HeLa細(xì)胞的檢測(cè)效果
本產(chǎn)品的檢測(cè)靈敏度高，線性范圍寬。96孔板中，20萬(wàn)個(gè)細(xì)胞以下都能呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。細(xì)胞種類、螢光素酶表達(dá)水平會(huì)影響線性范圍，當(dāng)螢火蟲螢光素酶表達(dá)量很高時(shí)，10萬(wàn)個(gè)細(xì)胞以下能呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。
圖1.本試劑盒與國(guó)外同類產(chǎn)品的檢測(cè)效果對(duì)比。
該產(chǎn)品使用靈活、操作便捷、檢測(cè)靈敏度高、測(cè)定樣品的線性范圍寬，性能優(yōu)于國(guó)外主要同類產(chǎn)品。（注：實(shí)際信號(hào)會(huì)因細(xì)胞種類、轉(zhuǎn)染效率、檢測(cè)儀器等的影響而略有差異，圖中數(shù)據(jù)僅供參考。）
For research use only. Not intended for human and animal therapeutic or diagnostic use.
