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服務介紹

金斯瑞2020年初引進Beacon?儀器。Beacon?是基于整合微流控技術、信號檢測系統和光誘導的雙向電泳技術的單細胞篩選儀器,應用于抗體研發中單B細胞篩選階段。從B細胞保有率方面,傳統雜交瘤篩選1%全B細胞庫,而Beacon?平臺篩選范圍涵蓋全部B細胞,從篩選時間方面,篩選僅1天節省12周時間,集合以上優點,Beacon?平臺助您快速獲得更高質量抗體。

服務特色

高概率捕獲目標克隆

更快篩選時間

自動化篩選流程

更高多樣性,更高親和力

服務詳情

antibody discovery via single b cell workflow

單B細胞篩選平臺工作流程主要分為下列三個階段:

階段 描述 周期
階段 I
動物免疫
動物免疫及起始物料準備 快速免疫:4周
傳統免疫:6-8周
階段 II
PBMC分離
B細胞擴增
PBMC分離及B細胞擴增 1周
階段 III
Beacon?儀器分選
B細胞收獲及單B細胞篩選 1天
階段 IV
單B細胞測序
多變區測序 1周
階段 V
小規模陽性克隆表達
重組抗體表達 約四天

注:*不同項目根據實際情況有所不同

案例分享

  • Case 1: 4-1BB Antibody Development
    munber 1

    Antigen Analysis: Human 4-1BB ECD Alignment

    ECD Domain Human Cyno Mouse Rabbit
    Human Homology 100% 95% 57% 68%
    munber 2

    High positive hits screening with Beacon

    Assay (SA) beads assay

    Assay (SA) beads assay

    Valid Nano-well: 7560; Positive cell : 932
    Positive%: 12.3%

    Cell-based assay

    Cell-based assay

    Valid Nano-well: 7560; Positive cell : 112
    Positive%: 1.48%

    munber 3

    NGS sequencing

    munber 4

    Validation of recombinant antibodies with ELISA & FACS

    case step 4 icon1 31 recombinant antibodies
    case step 4 arrow
    case step 4 icon2 19 clones positive to 4-1BB via ELISA
    case step 4 arrow
    case step 4 icon3 13 clones positive to human and cyno 4-1BB via FACS
    case step 4 arrow
    case step 4 icon4 2 clones positive to human, cyno, and mouse 4-1BB via FACS

    FACS, Median Fluorescence Intensity (MFI) +/-

    FACS, Median Fluorescence Intensity (MFI) +/-
    munber 5

    Affinity analysis of 4-1BB recombinant antibodies

    KD (M) = 9.701E-08

    KD (M) = 9.701E-08

    KD (M) = 7.069E-10

    KD (M) = 7.069E-10

金斯瑞研討會

單B細胞篩選平臺助力抗體研發

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