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概覽

體外分子優化可非常有效地生成改良或新型的突變蛋白,識別調控序列,并可探測結構和功能的關鍵殘基。用體外分子優化的方法構建合成文庫對蛋白特性、調控和功能的系統性研究是非常有效的途徑。

金斯瑞強大的基因合成技術能夠在避免成本增加的前提下,為客戶合成復雜蛋白的文庫。金斯瑞的合成文庫服務內容包括點突變文庫、點掃描文庫,以及簡并和隨機突變文庫服務。

服務

1. 點突變文庫服務

金斯瑞的點突變文庫融合了從頭合成基因和定點突變的專業技術。點突變文庫為客戶提供了良好的蛋白功能和活性中心的研究平臺。在這些文庫中,任何殘基都可以被其它19種常見的氨基酸所替代,產生系統的氨基酸突變組合,從而發現具有特殊活性的構型。

交付結果:

  • 10μg的突變產物
  • 混合的突變文庫,每個位點高達20個突變(以一個小庫的形式提供)
  • 單獨的突變
  • 序列驗證信息
  • 突變位點堿基分布的統計學分析
點突變文庫服務 點突變文庫服務

2. 點掃描突變文庫服務

連續的替換掃描是一種系統性的改善蛋白性能的方法。它采用全部20種氨基酸同時替換每種氨基酸的方式,優于標準的丙氨酸/半胱氨酸掃描法。這種技術提供了不同位置上每種氨基酸的詳盡屬性。對于每個目標密碼子,都可以構建一個小的點飽和文庫。這種文庫即可以一個大庫的形式交付,也可按突變以單獨的突變小庫(共19個)的形式交付。金斯瑞利用從頭合成基因技術在連續的替換掃描領域的應用,為客戶提供極好的序點掃描文庫構建服務。

交付結果:

  • 10μg的突變產物
  • 混合的突變文庫,每個位點高達20個突變(以一個小庫的形式提供)
  • 單獨的突變(可選擇)
  • 序列驗證信息
  • 突變位點堿基分布的統計學分析
點掃描突變文庫服務 點掃描突變文庫服務

3. 隨機突變文庫和簡并突變文庫服務

憑借我們先進的簡并退化寡核苷酸技術,金斯瑞能夠在合成DNA片段上生成任何形式的隨機或基因退化簡并全長基因。這一服務能夠在利用寡核苷酸范圍內來實現可控、高精度的隨機化。

金斯瑞的體外文庫合成技術能夠引入具有較大可控靈活性的隨機突變,突變頻率可以設置為1~20個突變/kb的范圍內的任意一個值。我們將對同組48、96或192個單獨的轉化株進行序列驗證。

交付結果:

  • 簡并PCR產物文庫 (高達1011個突變體):10μg線性DNA (擁有5'和3'酶切位點,可直接克隆)
  • 克隆庫 (高達109轉化株):亞克隆至定制載體的文庫,含有全部文庫轉化子的甘油菌
隨機突變文庫和簡并突變文庫服務 隨機突變文庫和簡并突變文庫服務

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