scFv是由抗體重鏈可變區和輕鏈可變區通過15-20個氨基酸的短肽連接而成，屬于小分子基因工程抗體。scFv保留了完整抗原活性，且具有穿透力強、體內半衰期短、免疫原性低、可在原核細胞系統表達以及易于進行基因工程操作等優點，在醫學和生物技術領域中有著廣泛的應用，這些應用包括細胞治療、疾病診斷、藥物遞送等。金斯瑞開發了一系列高質量的Anti-scFv抗體，助力您在基于scFv的抗體藥、雙特異性抗體及CAR-T等領域的研究。
圖1：全長抗體及scFv結構圖
MonoRab?兔單抗技術保證對scFv的高親和力Kd＜10-9 M；
在較低滴度下可通過流式細胞術準確檢測CAR-T細胞陽性率；可檢測到溶液中較低含量的scFv；
重組生產的單克隆抗體保證最優的批間差；
對未轉染CAR的T細胞、不表達scFv的細胞表現出極低的非特異性信號；
結合scFv后，不影響scFv對其靶抗原的結合；
| Antibody Description | Unconjugated | Biotin | FITC | PE | iFluor 488 | iFluor 555 | iFluor 647 | HRP |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Ex=491 nmEm=516 nm | Ex=565 nmEm=574 nm | Ex=491 nmEm=516 nm | Ex=557 nmEm=570 nm | Ex=656 nmEm=670 nm | ||||
| MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail | A02282 | A02283 | A02284 | A02285 | A02286 | A02287 | A02288 | A02289 |
| Anti-scFv Antibody Cocktail (Min X)* | A02303 | A02315 | A02304 | A02305 | A02306 |
*Anti-scFv antibody Cocktail (Min X) 對人IgG, 小鼠IgG, 山羊IgG和兔IgG無交叉反應。
金斯瑞的Anti-scFv抗體對基于scFv的CAR-T細胞表現出超高的特異性。實驗結果顯示不同稀釋比例的Anti-scFv抗體均能準確檢測CAR-T細胞的陽性率，且該抗體對未被編輯的T細胞表現出極低的非特異性結合，因此可用于CAR-T細胞的表征。
圖2：Anti-scFv抗體表征基于scFv的CAR-T細胞
使用不同稀釋比例（1：50-1：500）的MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 647] (GenScript, A02288) 檢測相同的CAR-T細胞。MonoRab? Rabbit IgG Control [iFluor 647] (Whole Molecule), mAb (GenScript, A02026)對CAR-T細胞的染色以及A02288對na?ve T細胞的染色作為陰性對照。
流式細胞術結果顯示Anti-scFv抗體相比于Protein L和Anti-Fab抗體具有更優的細胞分群效果和更高的檢出率。
圖3：基于scFv的CAR-T細胞表征工具比較
使用相同濃度的MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) 、FITC-Labeled Recombinant Protein L 和 Alexa Fluor? 647 AffiniPure Goat Anti-Human IgG, F(ab’)2 檢測相同數量和結構的CAR-T細胞。其中，Anti-scFv抗體的熒光信號由Alexa Fluor? 488-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG提供。
Anti-scFv抗體可用于檢測人源化scFv、鼠源scFv和雙特異性抗體對其靶蛋白的結合能力。
圖4：Anti-scFv抗體檢測scFv/雙特異性抗體對其靶抗原的結合曲線
抗原包被濃度為1 μg/mL；scFv濃度從1.37 ng/mL到1000 ng/mL；A02282濃度為1 μg/mL；酶標二抗使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb(GenScript, A01856)，稀釋比例為1：20000。靶點及scFv信息如下：Humanized scFv#1:anti-VEGF scFv; Antigen#1:VEGF; Mouse scFv#2: anti-BCMA scFv; Antigen#2: BCMA; Bispecific Antibody#3: anti-CD19×anti-CD3，BiTE; Antigen#3: CD3.
流式細胞術結果顯示Anti-scFv抗體對結合scFv的細胞表現出較高的特異性信號，對未結合scFv的細胞表現出較低的非特異性信號，因此可用于檢測scFv對其靶細胞的結合能力。
圖5：Anti-scFv抗體檢測scFv對其靶細胞的結合活性
使用MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [FITC](GenScript, A02284)分析anti-CD20抗體對Raji細胞的結合能力。其中藍色實線代表未染色細胞，紅色實線代表僅加入A02284的細胞，綠色實線代表加入anti-CD20 scFv和A02284的細胞。
ELISA結果顯示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282) 可特異性識別不同來源、不同連接順序（VH-VL或VL-VH）、不同linker的scFv以及不同形式的基于scFv的雙特異性抗體，如BiTE, IgG(H)-(scFv)2, (scFv)2-(H)IgG, scFv-Fab-Fc等。
圖6：Anti-scFv抗體對不同序列scFv和雙特異性抗體的結合曲線
不同來源、不同連接順序（VH-VL或VL-VH）、不同linker的scFv或不同形式的雙特異性抗體以1 μg/mL的濃度包被在酶標板上；A02282濃度從0.017 ng/mL到1000 ng/mL；酶標二抗使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb(GenScript, A01856)，稀釋比例為1：20000。
生物膜干涉技術（BLI）結果顯示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)對不同來源、不同連接順序（VH-VL或VL-VH）、不同linker的scFv以及不同形式的基于scFv的雙特異性抗體具有較高的親和力。
圖7：BLI檢測Anti-scFv抗體對不同序列scFv和雙特異性抗體的親和力
WB結果顯示MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)對不同來源scFv及雙特異性抗體BiTE均具有較高的靈敏度。
圖8：Western Blot檢測Anti-scFv抗體對不同來源scFv和雙特異性抗體的靈敏度
MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)按1：5000稀釋，4℃孵育過夜；二抗采用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10)[HRP], mAb (GenScript, A01856)，1：20000稀釋，室溫孵育1h。
三批次MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail (GenScript, A02282)對scFv表現出一致的結合曲線，各濃度點CV<10%。
圖9：ELISA檢測MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail的批次穩定性
scFv包被濃度為1 μg/mL；MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail（GenScript, A02282）從111 ng/mL開始進行3倍梯度稀釋；檢測抗體使用Mouse Anti-Rabbit IgG Fc Antibody (14H9H10) [HRP], mAb (GenScript, A01856)，稀釋比例為1：20000。
競爭ELISA結果顯示Anti-scFv抗體在與scFv的結合后并不影響scFv對其靶抗原的結合。
圖10：Anti-scFv抗體與scFv或雙特異性抗體的結合并不影響scFv或雙特異性抗體對其靶抗原的結合活性
Antigen #1、Antigen #2和Antigen #3包板后，將A02282與Humanized scFv #1、Mouse scFv #2或Bispecific antibody #3混合后加入孔板中反應，隨著A02282濃度的提高，Humanized scFv #1、Mouse scFv #2或Bispecific antibody #3對其靶抗原結合能力并沒有顯著變化，相比于未加入A02282的變化幅度在80%-120%之間，表明A02282對scFv結合其相應抗原的影響較小。靶點及scFv信息如下： Humanized scFv#1:anti-VEGF scFv; Antigen#1:VEGF; Mouse scFv#2: anti-BCMA scFv; Antigen#2: BCMA; Bispecific Antibody#3: anti-CD19×anti-CD3, BiTE; Antigen#3: CD3.
| 產品編號 | 名稱 | 數量 | 價格 | 操作 |
|---|---|---|---|---|
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A02282
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail |
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￥3150.00 200 μl |
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A02283
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [Biotin] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02284
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [FITC] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02285
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [PE] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02286
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 488] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02287
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 555] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02288
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [iFluor 647] |
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￥3150.00 200 μl |
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A02289
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MonoRab? Rabbit Anti-scFv Cocktail [HRP] |
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￥3150.00 200 μl |
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Anti-VHH抗體
| Product Type |
Species Specificity |
Unconjugated | Conjugated | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| HRP | Biotin | iFluor 488 |
iFluor 555 |
iFluor 647 |
PE | FITC | |||
| Anti-Camelid VHH, mAb |
Llama, Camel, Alpaca |
A01860 | A01861 | A01995 | A01862 | A01863 | A01994 | A02227 | A02226 |
| Anti-Humanized VHH, mAb |
Humanized, Llama, Camel, Alpaca |
A02165 | A02167 | A02166 | A02168 | A02169 | A02170 | A02171 | A02172 |
| Anti-Camelid VHH, mAb Cocktail |
Llama, Camel, Alpaca |
A02014 | A02016 | A02015 | A02021 | A02020 | A02019 | A02018 | A02017 |
