細胞系/池經測序驗證*、
Broad與ERS
全球1000+
Ph.D.專業金斯瑞提供多種CRISPR基因編輯細胞系，依托優勢的化學合成長單鏈sgRNA，可采用編輯效率高、毒性低的RNP遞送體系，同時支持慢病毒、質粒多種遞送體系，為您提供指定目的基因、編輯區域和細胞的基因編輯細胞系服務。
| 服務類型 | 服務詳情 | 細胞系選項* | 交付內容** | 交付周期 |
|---|---|---|---|---|
| GenCRISPR? EZ knock-out服務 |
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90+種常見適合轉染的細胞株（包括A549，CHO-K1，HT-29，MDA-MB-231，4T1，A20，HCT116，MCF7，MDCK，U937，RPMI 8866等） |
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3-6周（細胞池） 9-15周（細胞株） |
| GenCRISPR?定制化Knock-out服務 | 8-11周（細胞池） 16-24周（細胞株） |
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| GenCRISPR?定制化Knock-in服務 |
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任何細胞株 |
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12-25周（細胞株） |
| GenCRISPR?全長基因敲除服務 |
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任何細胞株 |
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13-23周（細胞株） 6-10周（細胞池） |
備注：
* 一般由客戶提供細胞系，如果金斯瑞提供細胞系，則需額外收費。且金斯瑞不提供原代細胞、干細胞或IPS細胞的基因編輯服務。
** 根據要求在mRNA或蛋白水平驗證全等位基因修飾細胞株。兩周一次的項目更新。
可選服務
| 附加服務 | 詳情 |
|---|---|
| 逆轉錄PCR（RT-PCR） | 通過RT-PCR進行測序，驗證敲除克隆在CDS上插入缺失標記的mRNA水平。 |
| Western blot | 通過WB實驗驗證敲除基因克隆，需提供于靶蛋白特異性結合的有效抗體。 |
| FACS分析 | 通過FACS實驗驗證敲除基因克隆，需提供于靶蛋白特異性結合的有效抗體。 |
| 啟動子活性分析 | 宿主細胞中啟動子（Cbh/CMV/EFS）的活性分析提升gRNA-Cas9的切割效率。 |
| 脫靶分析 | 通過對前5個潛在的脫靶位點進行測序來確定基因敲除克隆 |
| 附加單克隆 | 從同一個細胞庫中挑選出另外一個單克隆發給客戶。 |
圖1：K-ras敲除方法
圖2：親代細胞和K-ras-/-HCT116細胞sanger測序
圖3：K-ras敲除蛋白表達驗證
圖1：GS等位基因缺失引起移碼突變
圖2：在GS敲除細胞裂解液中，anti-GS抗體未檢測到谷氨酰胺合成酶
圖3：DG44(GS-/-)的L-谷氨酰胺依賴性
圖1：
圖2：PCR驗證gRNA對
圖3：缺失克隆篩選
