案例1. 慢病毒感染實驗
第二代病毒系統
金斯瑞
第三代病毒系統
金斯瑞
第三代病毒系統
其它公司
分別使用金斯瑞優化的三代病毒包裝系統,二代病毒包裝系統以及其他公司的包裝系統進行EGFP慢病毒包裝,測定滴度后調整成相同的MOI去感染等量的293T細胞,感染后72小時進行熒光拍照。升級后的金斯瑞三代系統感染效率最高。
案例2. GFP病毒感染Jurkat MOI測試
MOI | GFP% | 感染時間 |
---|---|---|
10 | 17.1% | 72h |
20 | 26.1% | 72h |
40 | 41.6% | 72h |
80 | 60.1% | 72h |
注:Jurkat細胞是一種難轉導的T淋巴細胞。使用金斯瑞第三代質粒系統包裝GFP病毒感染Jurkat細胞,經過測試,在MOI=80時,感染率達到60.1%。
案例3. GFP病毒感染BaF3測試
MOI=500
MOI=1000
MOI=2000
BaF3(鼠源B淋巴細胞)是一種極難轉染的細胞。使用金斯瑞第三代質粒系統包裝GFP病毒進行感染實驗。 在24孔板加入2x105細胞,3x108IFU/ml病毒(MOI分別設置為500/1000/2000)以及8μg/ml的polybrene,感染24h后換液,48h后進行熒光拍照。
結果顯示,在MOI=500時,感染效率超過80%。
案例4. 金斯瑞慢病毒包裝系統基因承載長度測試
Gene name | Target gene length | Titer(x10^6IFU/ml) |
---|---|---|
Gene 1 | 3773 bps | 343.0155 |
Gene 2 | 4698 bps | 358.6088 |
Gene 3 | 5498 bps | 184.6572 |
Gene 4 | 6622 bps | 261.1701 |
注:一般情況下,目的基因長度超過3000bps就很難達到高滴度水平,甚至無法包裝。金斯瑞的慢病毒包裝系統最高可達到6.6kb。對于常規基因,即GC含量適中,沒有復雜重復序列,不引起細胞致死等,5kb以內長度,金斯瑞均可保證108IFU/ml的滴度。