選擇合適的抗原是您開始定制抗體項目時重要的決定之一。如果您不確定如何開始,首先要考慮目標蛋白的性質以及您期望的應用。這些因素應作為指導抗原選擇策略的必要指南。 對于大多數項目,可以選擇兩種方法之一來實現定制化抗體生產。第一種也是較受歡迎的是使用蛋白作為免疫原。第二種運用抗原設計軟件,基于靶蛋白的天然序列預測出的短肽序列作為免疫原。下面提供了一個信息指南指導您選擇哪一種策略。
適用于以下應用:
適用于以下應用:
多肽抗原是基于天然靶蛋白的序列精心選擇的短氨基酸序列。當目標蛋白的獲取受限時,多肽是一種合適的解決方案。它們也是檢測靶蛋白翻譯后修飾(PTM)位點的理想抗原,因為它們限制了潛在表位的數量。雖然潛在表位少對于大多數抗體項目和應用來說是缺點,但是當產生PTM抗體時,有限數量的表位使得發現僅針對PTM位點的反應性抗體更易。
多肽抗原由于其價格低和周期短而具有吸引力,但更重要的是要考慮它的局限性。蛋白質抗原能夠誘導針對構象表位的抗體,而針對肽抗原的抗體只能識別線性表位。盡管多肽產生的抗體可以在其他應用中起作用。但多肽抗原的價值主要體現在翻譯后修飾檢測抗體的制備。例如,抗多肽抗體可以應用于Western blots和ELISA。然而,線性化蛋白必須包括用于免疫的固有線性多肽抗原的表位,以確保陽性結果。
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